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应用微生物学实验室检查诊断感染性疾病指南

美国感染性疾病学会(IDSA)和美国微生物学会(ASM)近日联合发布了“应用微生物学实验室检查诊断感染性疾病指南”,旨在指导临床医师选择有助于其诊断感染性疾病的实验室检查。相关内容于年7月发表在《临床感染性疾病》(ClinInfectDis)杂志上。

微生物学实验室检查在感染性疾病诊断中的重要作用要求临床医师与微生物学家密切合作。该指南由实验室专家和临床专家共同制定,提供了关于哪些检查对疾病诊断有价值及哪些检查对疾病诊断无价值的信息,旨在指导临床医师选择有助于其诊断感染性疾病的检查。

样本处理原则

恰当的样本处理对准确的实验室诊断与确诊很重要,会直接影响患者管理和患者转归。

样本处理原则如下:

对质量差的样本,必须予以拒绝。

2.医师不应使实验室报告“面面俱全”,提供可导致错误诊断和治疗的无关信息。

3.如有可能,必须避免“初始样本污染”。

4.实验室检查需要样本,而非拭子样本。

5.实验室检查必须遵循其操作手册或遵循合法操作。

6.应在给予抗生素前采集样本。

7.应对具有临床意义的菌株进行易感性检测,而非对所有微生物进行培养。

8.报告的微生物学实验室检查结果应该准确、重要,并与临床息息相关。

9.实验室应建立合作政策。良好的沟通和互相尊重为建立合作政策的基础。

10.样本标签必须准确、完整,结果应可靠。

该文件获得了IDSA和ASM的共同认可。由于诊断性微生物学为一门动态和快速变化的学科,因此未来需要适时修改。该指南的具体内容如下:

血流感染和心血管

系统感染

菌血症/真菌血症的实验室诊断要点:

就血液采集而言,最重要的是采集血量而非采集时间。

2.对于成人和大于2个月的儿童,应用氯己定或2%碘酊消毒静脉穿刺部位(不建议对小于2个月的儿童使用氯己定)。

3.在开始抗微生物治疗前,采集血液进行培养。

4.经导管抽血培养发生污染的风险更高(假阳性结果)。

5.在无法经静脉穿刺采集血液进行培养时,不要使用导管尖端血液进行培养。

6.切勿在培养前冷藏血液。

7.对于成人,使用2~3个血培养瓶,至少一个需氧瓶、一个厌氧瓶;对于儿童,使用1~2个需氧瓶。

8.肺炎链球菌和一些其他革兰氏阳性菌在厌氧瓶中可能生长最好。

血流感染和感染性心内膜炎

对于大部分血流感染(BSI)病原体,采用常规血培养方法即可在48h内获得培养结果。对于某些微生物,可能需要特殊培养基或非培养方法。对于大多数感染性心内膜炎病原体,常规血培养方法即可满足需要。对于成人,建议每个培养基采集20~30mL血液,对于儿童,根据年龄和体重采集适量血液。

血管导管相关感染

导管相关BSI诊断的基础是菌血症,其次是证明感染是由导管引起的。检测方法包括标准血培养显示阳性的时间、血培养定量和导管尖端或节段培养物。

感染性(真菌性)动脉瘤和血管移植物

感染性(真菌性)动脉瘤和血管移植物可能导致血培养结果阳性。确诊需进行显微镜检查和(或)从典型活检样本或移植物中采集病原体进行培养。

心包炎和心肌炎

对大部分心包炎患者和绝大部分心肌炎患者,均未对其进行病原学诊断,而是根据经验进行治疗。当确定感染具有临床重要意义时,应积极进行微生物学实验室检查做出诊断。

中枢神经系统感染

对于中枢神经系统感染,通常通过腰椎穿刺采集3或4管脑脊液以供诊断研究。在细胞离心后,准备脑脊液革兰氏染色并立即向医务人员报告阳性结果。

中枢神经系统感染的实验室诊断要点:

若可能,应在开始抗微生物治疗前采集样本。

2.如怀疑细菌性脑膜炎,应进行得2~4次血培养。

3.如可能为罕见微生物(如诺卡氏菌属、真菌、分枝杆菌等),由于需要进行特殊操作,应通知微生物学实验室。

4.切勿冷藏脑脊液。

5.尽可能采集多的样本以供多次研究(建议最少为1mL);优先对小样本进行多次检验。

脑膜炎

分子试验已经取代病毒培养用于诊断肠病毒性脑膜炎,但其不能常规用于检测脑脊液中的细菌。革兰氏染色可用于诊断细菌性脑膜炎。脑脊液细菌抗原检测不被推荐使用,但其对某些患者可能有一定的价值。对疑有细菌性脑膜炎的患者,应至少进行2~4次血培养,但不应推迟治疗。当对大量脑脊液进行检测时,采用抗酸杆菌涂片和(或)培养。建议采用脑脊液补体结合试验诊断球孢子菌性脑膜炎。

脑炎

引起脑炎最常见的病毒为单纯疱疹病毒(HSV)。核酸扩增试验(NAAT)用于诊断HSV脑炎的敏感性高(95%)。

局灶性脑实质感染

局灶性脑实质感染开始为脑炎,然后发展为坏死。免疫功能低下患者的脑脓肿最常由细菌引起。

中枢神经系统分流装置感染

分流装置用于使脑脊液转向,从而治疗脑积水。5%~15%分流可发生感染,若分流在血管处结束(脑室心房分流),应进行血培养。

硬膜下积脓、硬膜外脓肿和化脓性颅内血栓性静脉炎

磁共振成像(MRI)为诊断化脓性颅内血栓性静脉炎的最佳方法。

眼部感染

眼部感染的实验室诊断要点:

对于眼部样本,应该标记具体的解剖来源,即结膜或角膜,而不只是标记“眼睛”。

2.革兰氏染色法有助于诊断结膜炎,所以每个部位取2个拭子标本可能是适当的;未感染眼睛的配对样本可作为“对照”,以协助对培养或革兰氏染色结果进行阐述。

3.拭子样本为常规使用样本,但提供了最少量的信息。对于可疑病原体,应向实验室进行咨询。优选角膜刮片诊断角膜炎。

4.正常皮肤菌群通常不会引起结膜炎。

样本采集、处理和运送

标签上应注明样本来自哪只眼睛。对于需氧细菌和衣原体,通常进行培养或NAAT。对于结膜炎,建议采集2份拭子样本,一份用于培养,一份用于涂片标本。眼部标本由眼科医师采集。实验室应该向眼科医师提供必需的培养基和涂片,并应确保其在有效期内。前房或玻璃体吸出物可以留在无针注射器里,并放进外包装密封容器里运送。

眼眶和眼眶周围蜂窝织炎

眼眶周围蜂窝织炎的诊断基于血培养结果阳性,眼眶蜂窝织炎的诊断基于鼻窦骨膜下引流物培养结果。

眼睑和泪腺系统感染

眼睑炎、泪小管炎和泪囊炎为浅表感染,这些浅表感染的诊断与结膜炎相似。

结膜炎

对于细菌性结膜炎,应采用积极的革兰氏染色法和培养。对于沙眼衣原体,可适应证外使用NAAT分析。对新生儿结膜炎,可采用培养法或在有沙眼衣原体的情况下,采用直接荧光抗体(DFA)检测。

角膜炎

对于角膜炎,可采用NAAT分析进行诊断,在采集标本前,使用非抑菌生理盐水彻底清洗眼球表面。对不正确使用隐形眼镜造成角膜炎患者,不建议进行培养。

眼内炎

可采集玻璃体液或活检标本,用于诊断眼内炎。

葡萄膜炎/视网膜炎

对于葡萄膜炎和视网膜炎,其诊断应基于眼部检查,并且眼部检查应由有感染性疾病治疗经验的眼科医师进行。血清学检查可用于诊断眼弓形体病。巨细胞病毒(CMV)视网膜炎诊断可基于眼部检查和外周血CMVNAAT定量。建议采用脑脊液梅毒血清检查(VDRLtest)诊断梅毒性葡萄膜炎。

头颈部软组织感染

头颈部间隙和组织感染可由牙源性、口咽性或外源性原因引起。对于牙源性感染,其准确诊断依赖于从受累组织或组织间隙中采集的误吸物标本或炎症组织活检标本检查结果。上述标本必须放于厌氧容器中运送。还可使用革兰氏染色涂片。对于口咽性感染,应收集拭子标本。血培养是诊断会厌炎的首选方法。误吸物、盐水灌洗清除物和组织或组织刮屑为首选样本,上述样本必须放在无菌容器中运送。对于慢性鼻窦炎,鼻窦内窥镜吸出物为首选标本。

头颈部软组织感染的实验室诊断要点:

拭子样本不是首选样本。如有可能,采集组织、液体或吸出物。

2.有会厌炎时,切勿擦拭。

3.如疑有厌氧菌,使用厌氧容器运送标本。

4.运送过程中保持组织样本湿润。

牙源性和口咽部菌群引起的口腔及邻近间隙和组织感染

根据具体病原菌,可采用革兰氏染色法,细菌培养和血培养法。

口咽部和外源性病原体引起的乳突炎和恶性外耳炎

根据具体病原菌,可采用革兰氏染色法,细菌培养、抗酸杆菌培养和(或)涂片。

上呼吸道细菌和真菌感染

大部分鼻和咽喉感染由病毒引起。不恰当使用抗生素使得对抗生素耐药性增大,因此恰当诊断这类症状,必须进行实验室检查明确病因,从而指导采取正确的治疗。

上呼吸道感染的实验室诊断要点:

对于中耳炎或鼻窦炎,不建议采集吸出物拭子样本,建议采集吸出物进行培养。

2.在无样本培养结果的情况下,大部分中耳炎也可以被诊断和治疗。

3.对于咽喉样本,需要从咽喉和扁桃体采集样本,以避免在脸颊、牙龈和牙齿处采集样本。

4.流感嗜血菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎球菌和肺炎链球菌不是引起咽炎的病原菌,不应在咽喉培养物中寻找上述病原菌;鼻咽样本培养结果也不能准确预测鼻窦炎的病原体。

中耳炎

急性渗出性中耳炎(AOME)可能由细菌引起。最具代表性样本为中耳液,通过鼓膜穿刺术采集或在有耳漏或鼓膜管情况下,清洗耳道后用拭子采集引流物。

鼻窦炎

不建议使用拭子采集鼻窦样本,因为采集吸出物对确定病原体更有价值。可在内窥镜引导下使用拭子采集样本。对于成人上颌窦炎,可在内窥镜引导下用拭子从中鼻道吸出引流物。对于儿童上颌窦炎,由于从中鼻道可能取出定植在呼吸道的病原体,不建议取中鼻道引流物进行培养。有必要进行手术采集提示额窦、蝶窦或筛窦感染的样本。建议在内窥镜引导下采集鼻窦吸出物,明确引起鼻窦炎的真菌。

咽炎

培养、快速抗原检测、分子法已被用于明确引起咽炎的病原体。有共识认为,对于化脓性链球菌快速抗原检测结果阴性的儿童,应该进行培养或分子分析进一步确认。对于化脓性链球菌快速抗原检测结果阴性的成人,则无需进行培养或分子分析确认。新指南建议,可根据常规培养或快速抗原检测结果阴性来诊断成人化脓性链球菌咽炎。当认为C族和G族β-溶血性链球菌具有重要意义时,可用拭子采集咽部标本进行检测。

下呼吸道感染

下呼吸道感染的实验室诊断要点:

早晨第一口痰为最好的培养样本。

2.海藻酸钙拭子不可用于NAAT。

3.对于大部分阴性快速抗原检测结果,应采用其他方法进一步确认。

4.血培养、痰培养偶尔有助于明确病原体,对社区获得性肺炎高危患者尤为如此。

5.在采集特殊病原体(如百日咳博德特菌)前,应与实验室联系,以获取具体说明。

6.引起囊性纤维化患者肺部疾病加重的病原体范围已经扩大,对于某些患者,应采集分枝杆菌和真菌培养样本。

7.对于免疫功能下降的宿主,建议采用有创方法采集样本进行诊断。

支气管炎和细支气管炎

推荐NAAT联合培养替代DFA法用于百日咳博德特菌检测。NAAT可用于某些呼吸道病毒检测。

社区获得性肺炎

社区获得性肺炎的诊断基于出现的特殊症状和放射学特征,如肺部浸润和(或)胸腔积液。IDSA/ATS实践指南认为,对于非住院患者,诊断性检查为一选择。对于需要住院的患者,可进行血培养、痰培养和痰液革兰氏染色(质量好的样本),若疾病严重,可进行尿液抗原检验,以检测肺炎链球菌和嗜肺军团菌。实验室应在常规细菌培养前筛选唾液样本,拒绝质量差的样本。对于接受气管插管或不能采集充分的痰样本患者,可采集气管内吸出物或通过支气管镜检查获取样本。NAAT可用于检测肺炎支原体和肺炎衣原体。血清学检验仍为检测某些病原体的金标准。

医疗保健相关肺炎、医院获得性肺炎和呼吸机相关肺炎

美国胸科学会和IDSA推荐了两种诊断策略:临床策略和细菌策略。临床策略基于新发生肺部浸润及出现3种临床特征(发热、白细胞增多或白细胞减少和化脓性分泌物)的2种。明确引起肺炎的原因需依赖于对气管内吸出物或痰液进行革兰氏染色和半定量培养。细菌策略是对通过支气管镜检查或无支气管镜引导采集的下呼吸道分泌物进行定量培养。

胸膜腔感染

通过胸腔穿刺术采集大量胸膜腔积液,并立即手拿送到实验室或放厌氧转移培养基中运送。在某些情况下,还可在床旁将胸腔积液抽到血培养瓶中。当怀疑由肺结核或真菌引起胸膜腔感染时,应对胸膜活检标本进行培养。

囊性纤维化肺部感染

实验室检查应针对能够使患者肺功能降低的病原体。

免疫功能下降宿主肺炎

当快速和非损伤性试验(如尿或血清抗原检测和快速病毒诊断)不起作用时,需要手术采集肺部样本。建议微生物学实验室与感染性疾病医师和胸肺科医师合作制订手术采集样本方案。对于真菌感染,应联合使用组织病理学检查、免疫荧光染色法、培养和NAAT进行诊断。

胃肠道感染

胃肠道感染的实验室诊断要点:

用于诊断腹泻疾病的样本应为腹泻粪便。

2.仅应对腹泻粪便(而非成型粪便)进行毒素或NAAT,以检测难辨梭菌,除非医师指明患者患有肠梗阻。

食管炎

食管细胞钙荧光、或革兰氏染色、组织病理学检查及食管活检标本病毒培养能确立大部分诊断。

胃炎

有创和无创检查均可帮助诊断幽门螺杆菌感染。有创检查,如组织革兰氏染色和培养、组织病理学染色和直接尿素酶检查,需要采集之前2周未服用抗微生物药物或质子泵抑制剂患者内窥镜检查期间的活检样本。无创检查(如尿素呼吸试验和粪便抗原测定)的优势为,可使患者避免进行内窥镜检查和胃活检,并可检测治疗后病原体消除情况。

胃肠炎、感染性和毒素诱导腹泻

对于血性、发热性、持续性严重腹泻,建议进行粪便检查。如果怀疑有其他病原体可能需要特殊培养基,应咨询实验室。标本选择为腹泻性粪便。NAAT检查为首选检查。

粪便培养:使用粪便培养检测肠侵袭性细菌。建议将志贺毒素检测纳入常规检测。不建议将直肠拭子标本检测用于成人,但可将其用于有症状儿童。

肉毒梭菌:微生物学诊断基于血清、粪便和胃内容物/呕吐物中的肉毒梭菌检测。

难辨梭菌:产毒培养用于检测难辨梭菌最具敏感性和特异性,细胞毒素分析的敏感性略低。还可采用酶免疫分析法(EIA)和免疫色谱法检测毒素。也可采用NAAT进行检测,NAAT为诊断难辨梭菌所致小肠结肠炎的首选检测方法。腹泻性粪便样本也可用于诊断难辨梭菌所致疾病。实验室应该拒绝成形粪便,但对于肠梗阻或潜在中毒性巨结肠患者,应采集成形粪便。不再推荐使用EIA独立检测毒素。

寄生虫:对于最常见的寄生虫,可以使用免疫测定。根据免疫测定和特殊染色需要,对样本采取防腐措施。

直肠炎

直肠炎最常见的病因是性病传播因子,一个样本足以进行诊断。

腹腔内感染

腹腔内感染的实验室诊断要点:

实验室需要的是样本,而非拭子样本。必须采集足量样本以便微生物学实验室进行所有必要的检测。

2.脓肿的样本选择为脓肿物和脓肿壁样本。

3.仅有脓肿物不能检测出病原体,因为多形核中性粒细胞(PMN)可能已经破坏了微生物侵入的证据。

4.尽管大部分分子检测的敏感性很高,应该使用NAAT辅助培养检测结核分枝杆菌,并绝不单独使用NAAT。对于这些样本,目前尚无商用方法获得FDA批准,所以实验室必须对其使用的检测方法进行验证。

5.如果存在结核分枝杆菌,这通常是传播性疾病的征象,必须进行彻底的研究。

自发性细菌性腹膜炎和腹水

对于自发性细菌性腹膜炎和腹水,应采集足量(如有可能,10~50mL)积液(非液体拭子),并在使用抗微生物药物前运送到实验室。其他实验室检查包括液体分析和血培养。可将积液抽到需氧血培养瓶中,也可使用序列测定和16SPCR检测病原菌。

继发性腹膜炎

继发性腹膜炎的诊断基于侵袭性微生物来源,通常为泌尿生殖道或胃肠道菌群。若怀疑盲肠炎,应进行难辨梭菌毒素检测、粪便培养和血培养。腹腔液应放在厌氧容器中运送到实验室进行革兰氏染色及细菌培养。若怀疑CMV或淋球菌,应与微生物学实验室联系进行特殊准备。实验室应概述培养结果,选择性地检测某些病原体。

第三型腹膜炎

第三型腹膜炎患者的液体培养结果通常为阴性。适用于自发性或继发性腹膜炎的培养可能有帮助。

腹膜透析相关腹膜炎

收集10~50mL透析液进行培养和革兰氏染色,腹膜透析相关腹膜炎(PDAP)的血培养很少为阳性。也可将透析液直接抽到需氧血培养瓶中进行自动检测。

肝脏占位性病变

需要进行需氧和厌氧细菌培养。抗微生物治疗前采集样本进行血培养也有助于确定病因。

胆道系统感染

至少需要进行需氧细菌培养(如果适当采集了吸出物,则进行厌氧细菌培养)和革兰氏染色检测。当出现脓毒症和腹膜炎症状时,需要进行血培养和腹膜培养。

脾脓肿

对吸出物,应进行需氧和厌氧细菌培养、革兰氏染色检测,同时可进行血培养。

继发性胰腺感染

将坏死组织或胰腺吸出物送至实验室进行需氧细菌培养和革兰氏染色,同时还可进行2~3次血培养。

骨和关节感染

骨和关节感染的实验室诊断要点:

就样本采集而言,不建议采集拭子标本;需要采集吸出物或3~6份组织活检标本,为研究提供足量样本。

2.进行血培养,以检测导致骨髓炎和关节感染的一些病原体,而非用于检测导致假关节感染的病原体。

3.除了将关节液放进无菌容器中直接处理,还应将其等份注入需氧血培养瓶中,最好在床边进行上述操作。

4.对于假关节感染的诊断,需采集3~6份独立的组织样本。使用超声或砂磨机均匀处理从假体上采集的样本是检测生物膜病原体的极好替代方法。

5.当怀疑有厌氧细菌时,应用厌氧容器运送。

6.对于导致关节感染的一些病原体,不可采用培养方法,需采用分子方法和(或)血清学检测。

骨髓炎

骨髓炎病原体检测需要采集骨活检样本,并采集尽可能多的样本,可以包括完整骨片、削屑、刮屑和切除的坏死物质。关节感染病原体检测,需要采集关节内滑液和(或)滑膜活检样本。

关节感染

区分真正的凝固酶阴性葡萄球菌感染与假关节周围组织切除术中发生的感染,需采集3~6份独立的组织活检标本或刮匙物。对于怀疑发生感染者,术前应采集关节液。梅奥诊所建议,对假关节活检标本进行超声处理,并对超声处理后的液体进行培养。还可采用砂磨机对样本进行处理。

泌尿道感染

当怀疑患者患有脓毒症时,可采用革兰氏染色法检测革兰氏阴性杆菌。建议采集泌尿道病原体培养样本前清洗皮肤。如果需要从留置导管中采集标本,应从新插入导尿管口采集标本。应清楚地辨别采用有创方法(如膀胱内镜检查或耻骨上吸引术)采集的样本。

泌尿道感染的实验室诊断要点:

尿液不应在室温下放置超过30min,若30min内不进行培养,应将尿液放入冰箱保存。

2.若脓尿筛查结果为阴性,对尿液进行培养,医院操作规范。

3.尿液样本中有3种或更多种细菌,通常表明采集标本时出现污染,结果会出现误差。

4.若未事先咨询实验室,并且未提供实验室操作手册中未涉及样本培养结果阐述标准,请不要要求实验室报告“样本中含有的所有病原体”。

生殖器感染

生殖器感染的实验室诊断要点:

1.对于阴道疾病(阴道菌群改变)革兰氏染色法比培养或探针检测更具有特异性,因此不建议进行培养。

2.区别HSV-1和HSV-2抗体,需对特异性糖蛋白G(gG)进行分析。

3.同时检测沙眼衣原体(CT)、淋球菌(GC)和毛滴虫属,是女性患者最常见可治疗性传播感染(STI)的最佳检测方法。

4.使用阴道和直肠拭子在妊娠35~37周时筛查B族链球菌。

5.对于妊娠初期和13~64岁性活跃患者,筛查有无合并人类免疫缺陷病毒(HIV),以评估有无STI。

6.对配偶进行检查,对检查结果阳性患者进行治疗,以预防再次感染。

生殖器损伤

美国疾病预防控制中心(CDC)指南建议,对于所有合并生殖器损伤患者,均应进行血清学检查。对于疑似HSV生殖器损伤,病毒培养、DFA检测和(或)NAAT是最常用的诊断方法。对于儿童生殖器损伤,还应考虑水痘带状疱疹病毒(VZV)的非典型表现,DFA是检测VZV的最佳方法。新指南还建议采用基因分型检测方法。

阴道疾病和(或)阴道炎

对于阴道疾病和阴道炎,可对阴道排泄样本进行一系列床旁检测。

尿道炎及宫颈炎

NAAT是实验室检测沙眼支原体和淋球菌的首选方法。NAAT也是检测生殖器支原体的最佳方法。不建议采用培养方法检测尿素支原体。

女性骨盆感染

诊断性检测依赖于疾病严重性、流行病学危险评估和是否进行有创操作,如腹腔镜检查和(或)子宫内膜活检。

特殊人群

应将遭性侵犯的儿童送到专门处理此类情况的场所或诊所。不适宜对妊娠妇女进行筛查试验(血清学检查、粪便培养)。

皮肤和软组织感染

浅表(如伤口)培养对诊断通常无指导价值,活检有助于诊断。

皮肤和软组织感染的实验室诊断要点:

1.不要在标签上仅标注“伤口”,应标注具体的部位和伤口类型(如“人咬伤、关节伤”)。

2.样本选择为深部病变活检样本,仅浅表拭子样本是不够的,其不能代表疾病进程。

3.请不要要求实验室报告“样本中包含的所有病原体”。

烧伤创面感染

建议采集足量浅表拭子样本或组织活检样本进行培养。建议对样本进行定量培养。进行血培养,检测继发于创伤的全身性疾病。NAAT通常仅限于检测血液或体液中的病毒。

人咬伤伤口感染

应采用革兰氏染色法对样本进行检测,以评估有无炎症、浅表感染和微生物。

动物咬伤伤口感染

动物咬伤病原体高度依赖于咬出伤口的动物类型。

创伤相关皮肤感染

强烈建议,不要在创伤48h内采集样本进行培养。采集培养样本的最佳时间为对创伤部位清创后即刻采集。

手术部位感染

为了优化实验室检测结果,应反对在手术过程中采集拭子样本,而应采集组织、液体或吸出物样本。

介入性放射学治疗和引流装置

引流液为最佳样本。无菌采集所有液体并将其装入适当的容器,如血培养瓶(需氧),无菌、防漏容器(如尿液杯)或含柠檬酸盐血液收集管,然后运送到实验室。

皮肤真菌感染

除了推荐的最佳样本和相关培养,真菌血清学检测常常有助于诊断全身性真菌病。尿抗原检测有助于诊断组织胞浆菌病和芽生菌病。对于不完全真菌(dematiaceousfungi),应采用Fontana氏染色法检测真菌产生的少量黑色素。

蜱感染

蜱媒回归热、埃里希体病、边虫病和巴贝虫病均可通过外周血涂片检测快速诊断。

蜱感染的实验室诊断要点:

1.蜱传播疾病很难诊断,因为其症状不具有特异性,包括发热、发冷、疼痛和皮疹。

2.患者的旅行史、最近所在位置和潜在的蜱叮咬对诊断很重要。

3.通常需要咨询微生物学实验室以确定接受的标本、实验室的位置和结果回报时间。

病毒综合征

病毒综合征的实验室诊断要点:

1.病毒综合征的诊断依据患者年龄、免疫状况、病史和许多其他因素。

2.可以采集样本,并对其进行检测,以找到最可能的病原体,并将其他样本冷藏在实验室,必要时,进行其他检测。

3.样本采集和处理是获得可靠检测结果的必要组成部分。咨询微生物学实验室以确定应该采集哪些样本及如何运送到实验室。

4.许多实验室不能进行病毒学检测,检测被送至其他实验室进行,导致结果回报时间较长。

5.某些病原体之间存在交叉反应,这会导致出现非特异性血清学检查结果。

6.即使考虑同一种病毒感染时,也应采用不同的方法对免疫功能、既往病毒感染(例如,组织捐献者)和新发感染进行检测。

人类免疫缺陷病毒

原发性(急性)HIV-1感染的实验室诊断通常基于高定量HIV-1RNA(病毒载量)结果(通常copies/mL)、或HIV-1RNA和(或)原病毒DNA定量检测。

EB病毒

快速单滴(Monospot)或异染性(heterophile)检查结果为阴性时,可考虑其他实验室检查以区分EB病毒感染与单核细胞增多症相似疾病。

巨细胞病毒

对于疑似急性CMV感染的免疫功能正常患者,建议进行CMV病毒特异性抗体检测,并将其作为一线实验室诊断性检测。

水痘带状疱疹病毒

NAAT是诊断VZV相关皮肤病变的最敏感性和特异性检测。不建议进行培养检测VZV。

单纯疱疹病毒

NAAT是诊断HSV相关皮肤或肌肉病变的最敏感性、特异性和最快速的检测方法,应检测并区分HSV-1和HSV-2。

人类疱疹病毒

NAAT是诊断人类疱疹病毒(HHV)-6最常用的分子检测。

细小病毒(红病毒)B19

对于患有传染性红斑、关节痛或关节炎的免疫功能正常患者,建议进行细小病毒B19特异性抗体检测,并将其作为一线实验室诊断方法。

麻疹病毒

采用血清学检查方法诊断急性麻疹,要求IgM抗体滴度增长4倍。也可采用NAAT法进行诊断。应将拭子标本放进病毒转移培养基、细胞培养基或其他无菌等渗溶液中。

腮腺炎病毒

实验室诊断腮腺炎的标准包括:腮腺炎IgM抗体的血清学检测结果为阳性、血清腮腺炎IgM抗体水平在急性和康复期增长4倍、从临床样本中分离出或检测到腮腺炎RNA。

风疹病毒

血清学检查是确诊风疹最常用的方法。

BK病毒

NAAT检测到血浆中存在一定水平的BK病毒,提示出现同种异体肾移植早期病变。尿液细胞学检查和NAAT定量可作为筛查检查,若上述检查结果为阳性,进行BK病毒载量检测。

JC病毒

对疑似进行性多灶性白质脑病患者,采用NAAT法检测脑脊液样本中JC病毒DNA,已经替代实验室诊断对组织活检的需求。

登革热病毒

登革热诊断需要实验室通过培养、NAAT或登革热特异性抗体检测确认。血清学检查为诊断登革热最常用的方法。

甲型肝炎病毒

诊断急性甲型肝炎病毒感染,可以通过检测甲型肝炎特异性IgM抗体确定。

乙型、丁型和丙型肝炎病毒

乙型肝炎和丁型肝炎诊断主要通过血清学和分子检测。丙型肝炎病毒可在感染后不久和慢性感染中通过NAAT检测到。

肠道和副肠孤病毒

NAAT检测用于诊断肠道病毒所致中枢神经系统感染的敏感性高于培养。

呼吸道合胞病毒

理想的检测方法为,对通过清洗、吸入或拭子采集的分泌物进行NAAT检测。

流感病毒感染

通过NAAT或直接抗体检测法可快速检测到流感病毒,并且NAAT法的敏感性高于直接抗体检测法。

西尼罗病毒

西尼罗病毒的实验室诊断通常是检测血清病毒特异性IgM抗体。

腺病毒

腺病毒诊断基于NAAT、培养和(或)组织病理学检测。

狂犬病病毒

对唾液、血清、脊髓液和颈部毛囊皮肤活检标本进行检测。

淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒

血清学诊断基于急性期至恢复期IgG滴度升高4倍,或IgM阳性。

血液和组织寄生虫感染

实验室确认寄生虫最常用的样本为全血、组织吸出物/活检物和血清。

血液和组织寄生虫感染的实验室诊断要点:

显微镜检查是实验室诊断的基石,但其具有高度主观性,并依赖于技术专家的经验和培训。

2.正确的样本采集和运送为进行形态学观察和培养的重要组成部分。

3.血清学检查显示,寄生虫(包括丝虫)之间存在明显的交叉反应。

4.在美国,可用于血液和组织寄生虫抗原检测的方法有限。

5.自动血液分析仪可能无法检测疟疾或巴贝虫病寄生虫,如果怀疑有上述任一病原体,则需要进行评估。

6.NAAT有助于检测低寄生虫血症或在显微镜下无法区分的病原体。

7.NAAT不用于检查患者对治疗的应答,因为在成功治疗后数天至数周均可能检测到DNA。

8.应用核酸检测血液和组织寄生虫,目前只能在专门的实验室进行,因此结果回报时间可能会延长。

巴贝虫病和疟疾

检测巴贝虫病和疟疾寄生虫的标准方法为,通过显微镜检测Giemsa染色的血涂片。理想样本是采集毛细血管(或动脉)血液,更实际的是,采集乙二胺四乙酸(EDAI)(优先)或肝素抗凝血液。

美洲锥虫病

诊断急性感染期美洲锥虫病的标准方法是,通过显微镜检测Giemsa染色的血涂片。诊断潜伏期和慢性期美洲锥虫病可基于显微镜检测组织吸出物或活检标本结果。

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