眼弓蛔虫病患者眼内液与血清犬弓蛔虫特异性
本文原载于中华眼底病杂志年10期
眼弓蛔虫病是主要由犬或猫的蛔虫幼虫侵犯眼内组织引起的感染性疾病，可造成严重的视力损害，甚至致盲[1,2,3]。临床上对其诊断主要依赖特征性的临床症状，但部分患者临床表现并不典型且缺少特异性，容易误诊或漏诊，利用实验室检查来辅助诊断有重要的临床意义。目前实验室检查的主要方法是以犬弓蛔虫幼虫排泌抗原包被固相，检测血清中针对幼虫的特异性抗体[4]。然而有部分患者血清的弓蛔虫IgG抗体表现为阴性或低滴度，为临床诊断带来困难。有研究发现，眼内液的弓蛔虫IgG抗体阳性可作为实验诊断的重要依据[5,6]。为验证眼内液犬弓蛔虫特异性IgG抗体检测在眼弓蛔虫病实验诊断中的价值，我们对一组眼弓蛔虫病患者的血清及眼内液样本同时进行了犬弓蛔虫特异性IgG抗体水平检测。现将结果报道如下。
1 对象和方法
年11月至年7月在复旦大医院眼科确诊为眼弓蛔虫病的50例患者50只眼(眼弓蛔虫病组)纳入本研究。其中，男性32例，占64.00%；女性18例，占36.00%；年龄2～35岁，平均年龄11.44岁，中位年龄8.5岁。以年龄≥18岁为成年。未成年患者41例，占82.00%；成年患者9例，占18.00%。未成年患者发病率较成年患者偏高，差异有统计学意义(χ2＝38.44，P0.05)。未成年患者中男性发病率明显高于女性，差异也有统计学意义(χ2＝9.，P0.05)(表1)。患者病程为1周～10年，平均病程为(10.6±19.7)个月。45例患者能明确其常住地区，其中常住在乡村地区40例，占88.89%；华东地区46例，占92.00%，华中地区4例，占8.00%。38例患者有猫狗接触史，占76.00%。
所有患者均符合眼弓蛔虫病的诊断标准，即后极部或周边部肉芽肿伴玻璃体牵引条索，或中至重度玻璃体炎性反应伴视网膜炎性团块，并排除其他病因[1]。纳入例在我院耳鼻喉科就诊的患者作为血清对照组。其中，男性94例，女性58例；年龄1～79岁，平均年龄(26.51±20.05)岁。未成年患者69例，占45.39%；成年患者83例，占54.61%。同时纳入70例眼科其他病患者作为眼内液对照组。其中，白内障26例，青光眼20例，细菌性眼内炎10例，急性视网膜坏死14例。
经我院伦理委员会批准并获得所有患者的知情同意后，收集眼内液μl及静脉血3ml，静脉血离心后分离血清。眼弓蛔虫病组收集房水样本28份，玻璃体液样本22份，血清样本50份。眼内液对照组收集白内障、青光眼患者的房水样本，共46份；收集细菌性眼内炎、急性视网膜坏死患者的玻璃体液样本，共24份。血清对照组收集血清样本共份。采用ToxocaraCanis酶联免疫吸附试验试剂盒(国药控股公司)检测患者眼内液及血清中犬弓蛔虫特异性IgG抗体的阳性率。检测步骤根据试剂盒说明书进行，眼内液与血清样本采取相同的稀释方法。酶标仪型号为TecanSunrise(瑞士TECAN贸易有限公司)。抗体水平用U值表示，U＝标本吸光度[A，旧称光密度(OD)]值×10/临界值。根据试剂盒使用说明，血清U值大于10时为阳性，小于等于10时为阴性。眼内液U值大于眼内液对照组房水或玻璃体液样本的平均U值加2倍标准差为阳性，小于或与其相等时为阴性。同时对眼弓蛔虫病组患者的血清及眼内液样本进行配对检测，对比分析两者之间的犬弓蛔虫特异性IgG水平的差异。
采用IBMSPSSStatistics19统计软件进行统计学分析。组间比较采用卡方检验和Mann-WhitneyU检验。P0.05为差异有统计学意义。
2 结果
眼弓蛔虫病组50例患者中，血清犬弓蛔虫特异性IgG阳性34例，阳性率68.00%；U值为20.42±17.01。血清对照组例患者中，血清犬弓蛔虫特异性IgG阳性4例，阳性率为2.63%；U值为2.37±2.71。其中，未成年、成年患者各2例；未成年患者与成年患者血清犬弓蛔虫特异性IgG阳性率比较，差异无统计学意义(χ2＝0.，P＝0.)。与血清对照组比较，眼弓蛔虫病组患者血清的特异性IgG水平明显偏高，差异有统计学意义(Z＝8.，P＝0.)(图1)。
图1
眼弓蛔虫病组与血清对照组患者血清犬弓蛔虫特异性IgG抗体水平比较
眼弓蛔虫病组50例患者中，眼内液犬弓蛔虫特异性IgG阳性44例，阳性率88.00%；U值为25.72±23.04。眼内液对照组未见眼内液犬弓蛔虫特异性IgG阳性者，U值为0.69±0.34。与眼内液对照组比较，眼弓蛔虫病组患者眼内液的特异性IgG水平明显偏高，差异有统计学意义(Z＝8.，P＝0.)(图2)。
图2
眼弓蛔虫病组与眼内液对照组患者眼内液犬弓蛔虫特异性IgG抗体水平比较
眼弓蛔虫病组50例患者中，血清及眼内液犬弓蛔虫特异性IgG均为阳性者28例，占56.00%；血清犬弓蛔虫特异性IgG阳性，而眼内液犬弓蛔虫特异性IgG阴性者6例，占12.00%；血清犬弓蛔虫特异性IgG阴性，而眼内液犬弓蛔虫特异性IgG阳性者16例，占32.00%。血清与眼内液犬弓蛔虫特异性IgG阳性率比较，差异有统计学意义(χ2＝4.，P＝0.)。
眼弓蛔虫病组患者的血清及眼内液样本配对检测结果显示，32例患者的眼内液犬弓蛔虫特异性IgG水平高于血清样本，占64.00%。
3 讨论
本组能明确其常住地区的45例患者中，88.89%的患者常住地为乡村，76.00%的患者有宠物接触史。推测这些眼弓蛔虫病的发生可能与宠物豢养逐渐增多，而乡村的宠物驱虫及公共卫生并未受到充分重视有关。美国疾病控制中心曾报道美国南部的发病率高于北部[7]。我们对患者的常住地省市进行分析，发现华东地区占大多数。由于到我院眼科就诊的患者大部分来自华东地区，尚不能认为华东地区人群具有较高的流行率，还有待于全国范围内进一步流行病学调查的研究。患者平均病程为(10.6±19.7)个月，近一半的患者从发病到确诊的时间都超过半年。这可能与乡村地区的医疗条医院医生缺少对眼弓蛔虫病的诊断经验有关。与发达国家相比，我国眼弓蛔虫病患者的临床症状往往更为严重，这与疾病得不到及时诊断、治疗有很大关系[8]。
弓蛔虫的血清流行病学调查结果在不同国家、地区、人群中的差异较大[9,10,11,12]。有研究发现，成年人阳性率为4%～46%，学龄儿童可高达77.6%[13]。本研究结果显示，血清对照组患者的血清犬弓蛔虫特异性IgG阳性率为2.63%，较文献报道结果偏低。但这可能与本研究样本量较小，且缺乏足够例数的各省市乡村地区儿童作为对照，不能客观估计国内弓蛔虫的血清阳性率有关。尚需对不同地区的人群进行大样本的血清流行病学调查来进一步研究。
Akiyama和Ohta[14]检测了被感染了犬弓蛔虫的兔眼内液特异性IgG、IgA、IgM、IgE，发现仅有IgG具有诊断价值。本研究结果显示，眼弓蛔虫病患者的血清及眼内液均可出现犬弓蛔虫特异性IgG水平的增高，64.00%的患者眼内液犬弓蛔虫特异性IgG水平要高于血清样本，并且眼内液犬弓蛔虫特异性IgG阳性率也明显高于血清样本。通过配对检测患者血清及眼内液样本，我们发现32.00%的患者血清犬弓蛔虫特异性IgG阴性，而眼内液犬弓蛔虫特异性IgG为阳性。意味着如果仅依靠血清抗体检测，则可能有32.00%的患者漏诊。deVisser等[13]报道了3例眼内液犬弓蛔虫特异性IgG阳性的儿童，其血清检测结果均为阴性，认为检测眼内液特异性抗体有重要的临床价值。我们分析认为眼内液样本阳性而血清样本阴性的现象可能是由于病原体局限于眼部，外部感染受控制后，外周血中的特异性IgG出现衰减。
本研究结果表明，眼内液犬弓蛔虫特异性IgG抗体检测相对于血清具有更高的检出率；眼内液与血清犬弓蛔虫特异性IgG抗体的共同检测可能具有更高的诊断价值，有助于非典型病例的诊断，提升临床眼科医生对眼弓蛔虫病的诊断经验。 （参考文献：略）
本文编辑：唐健
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